科研产出
刺葡萄愈伤组织褪黑素生物合成基因SNAT2、COMT3的克隆及其对光质的响应
《应用与环境生物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：5-羟色胺-N-乙酰基转移酶（serotonin N-acetyltransferase,SNAT）和咖啡酸-O-甲基转移酶（caffeic acid O-methyltransferase,COMT）是植物褪黑素合成途径的关键酶，对褪黑素的生物合成有重要的调控作用.以刺葡萄愈伤组织为材料，分别克隆获得了VdSNAT2和VdCOMT3，对其生物信息学及启动子顺式作用元件进行预测，结合实时荧光定量PCR技术，分析不同光质处理下刺葡萄愈伤组织中褪黑素含量与VdSNAT2和VdCOMT3基因表达的相关性.结果表明，VdSNAT2和VdCOMT3基因ORF分别为549 bp和1 158 bp，分别编码182和385个氨基酸，其编码蛋白前者为亲水蛋白，后者为疏水蛋白，亚细胞均定位于叶绿体；蛋白保守基序和进化树分析表明，刺葡萄VdSNAT2和VdCOMT3蛋白与葡萄的SNAT2和COMT3具有相同的保守基序，且两者进化相似、亲缘关系近.启动子顺式作用元件预测发现，VdSNAT2和VdCOMT3启动子序列中均有大量光响应等多种生物/非生物响应元件.qRT-PCR分析表明，光质显著影响VdSNAT2和VdCOMT3基因的表达，其中红光对刺葡萄愈伤组织中VdSNAT2和VdCOMT3基因表达的促进作用最为显著，与褪黑素含量具有正相关性，同时VdSNAT2和VdCOMT3基因对褪黑素的生物合成调控具有协同作用.本研究表明光质可以影响VdSNAT2和VdCOMT3基因的表达，从而定向调控刺葡萄愈伤组织褪黑素的生物合成.（图9表1参41）
关键词： 刺葡萄 愈伤组织 褪黑素 光质 5-羟色胺-N-乙酰基转移酶 咖啡酸-O-甲基转移酶
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茶树苯乙醇樱草糖苷含量相关遗传位点的挖掘
《园艺学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：以169个茶树种质作为关联群体,利用基于简化基因组测序(genotyping-by-sequencing,GBS)技术开发的675245个高质量SNP标记在2018-2020年3个年份间,对茶树新梢中苯乙醇樱草糖苷的含量进行了全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS).结果表明,不同年份茶树种质间的苯乙醇樱草糖苷的含量变异系数为61.50%~62.09%,相关系数介于0.95~0.98(P<0.01),广义遗传力为67.49%.3种GWAS分析模型共检测到24个与茶树苯乙醇樱草糖苷含量显著关联的稳定位点(P<0.001),解释表型变异率为0.01%~10.63%.进一步利用等位变异效应分析挖掘到36个具备24个主效位点优异等位变异且苯乙醇樱草糖苷含量显著升高的优异种质.初步筛选出10个与苯乙醇樱草糖苷含量相关的候选基因,分别为TEA020086.1、TEA003248.1、TEA013029.1、TEA021435.1、TEA016196.1、TEA029411.1、TEA014564.1、TEA014567.1、TEA014571.1和TEA014573.1,这些基因主要涉及茶树次生代谢与转录调控分子过程.
关键词： 茶树 苯乙醇樱草糖苷 全基因组关联分析 候选基因 优异等位变异
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鸭疫里默氏菌噬菌体宿主谱的拓宽
《动物医学进展 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为建立一种拓宽鸭疫里默氏菌噬菌体噬菌谱的方法,将6株噬菌体混合液分别与6株宿主菌、18株多重耐药鸭疫里默氏菌(不能被6株噬菌体中的任何1株裂解)培养,收获培养液中的噬菌体,混合后同样进行30次传代.噬斑分析法测定30代混合液及混合液中单一噬菌体的噬菌谱.结果表明,30代噬菌体混合液可裂解79.2%(19/24)的鸭疫里默氏菌试验菌株;30代噬菌体混合液中分离出的单一噬菌体能裂解的试验菌株数量为2~9株;裂解数最多的5株单一噬菌体,以各自宿主菌传代10次,噬菌谱没有发生变化;将裂解谱互补的单一噬菌体混合,4株噬菌体即可裂解19株试验菌株,与30代噬菌体混合液相同.说明建立的方法可以拓宽噬菌体混合液、单一噬菌体的噬菌谱,为噬菌体鸡尾酒制剂的毒株选择奠定了基础.
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滑液囊支原体与鸡传染性支气管炎病毒共感染对SPF鸡的致病性研究
《中国预防兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为比较滑液囊支原体（MS）和鸡传染性支气管炎病毒（IBV）共感染对SPF鸡的致病性，本研究将144只28日龄SPF鸡随机均分为阴性对照组、MS感染组、IBV-M41感染组、IBV-M41+MS共感染组、IBV-QX感染组、IBV-QX+MS共感染组共6组，采用50μL/只剂量按相应分组点眼感染MS （106CCU50）、IBV（105EID50），阴性对照组以50μL/只点眼KM2培养基（左眼）和PBS （右眼）。感染后每天观察临床症状，在感染后7 d、14 d、21 d和28 d每组随机剖检6只鸡，观察气囊炎和气囊损伤评分，并采集气管进行病原再分离，其中MS经支原体液体培养基培养后进行PCR鉴定，IBV接种SPF鸡胚后进行RT-PCR鉴定。此外，各组鸡气管均经10%甲醛固定后进行粘膜厚度检测以及病理损伤评分。结果显示：除阴性对照组和MS感染组，其他组鸡在感染后4 d均出现一过性呼吸道症状。剖检结果显示MS感染组鸡在感染后21 d出现气囊炎，28 d仍可见气囊炎；而IBV-M41感染组和IBV-QX感染组鸡在感染后7 d或14 d出现气囊炎，且气囊炎的发生率均未超过50%。感染后14 d IBV-QX+MS共感染组鸡气囊炎发生率达100%（6/6），直至21 d并且大部分鸡气囊炎可持续至感染后28 d （5/6），而IBV-M41+MS共感染组鸡气囊炎仅可持续至感染后21 d，且气囊炎的发生率最高在感染后14 d （5/6）。IBV-QX+MS共感染组鸡平均气囊损伤评分在感染后14 d、21d和28 d均极显著高于单一感染组（P＜0.001），而IBV-M41+MS共感染组鸡仅在感染后14 d极显著高于单一感染组（P＜0.001）。病原再分离结果显示，各感染组鸡均在气管中再分离到MS（感染后28 d内）或IBV（感染后7 d内）。病理损伤检测结果显示，共感染组鸡较各单一感染组鸡气管粘膜增厚持续时间更长以及病理损伤更为严重。IBV-M41+MS共感染组鸡在感染后14 d平均气管粘膜厚度显著低于IBV-QX+MS共感染组（P＜0.05），而在感染后21 d极显著低于IBV-QX+MS共感染组（P＜0.001），其余各组鸡在感染后14 d和21 d均极显著低于IBV-QX+MS共感染组鸡（P＜0.001）。IBV M41+MS共感染组鸡最早14 d出现气管病变，而IBV QX+MS共感染组鸡在共感染后7 d就可见气管病理损伤，且共感染组鸡的平均气管损伤评分均极显著高于单一MS或IBV感染组（P＜0.01或P＜0.001）。上述结果证实MS和IBV共感染较单一感染对28日龄SPF鸡的致病性更强，IBV M41或QX株与MS共感染对SPF鸡的致病性存在差异，本研究为临床IB和MS的防控提供科学参考依据。
关键词： 滑液囊支原体 鸡传染性支气管炎病毒 共感染 致病性
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冠突散囊菌Ec-12上清抑制小鼠的伤寒沙门菌机制的初步分析
《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本研究旨在筛选黑茶中有益的冠突散囊菌（Eurotium cristatum,EC）并揭示该菌上清抑制鼠伤寒沙门菌（Salmonella Typhimurium）的初步机制。采用稀释涂布法分离冠突散囊菌；通过形态学和ITS rRNA基因序列分析其分类地位；采用生长速率法分析其增殖条件及增殖的稳定性；采用琼脂扩散抑菌试验、耐酸碱、耐热及紫外光稳定性试验、电镜观察及小鼠动物试验等以评估该Ec-12上清抑制鼠伤寒沙门菌的初步机制。结果显示：筛选到一株有较强抑制鼠伤寒沙门菌作用的冠突散囊菌Ec-12,抑菌圈分别为10.4 mm±1.5 mm。根据形态学、生长特征及ITS rRNA基因序列分析，将其鉴定为冠突散囊菌，并命名菌株Ec-12。粗分离的菌株Ec-12上清在pH近中性条件产生较好的抑菌效果，抑菌稳定好。经电镜观察可见粗分离菌株Ec-12上清导致鼠伤寒沙门菌的菌体变形，表层粗糙等抑菌现象。并明显降低小鼠感染鼠伤寒沙门菌引起的腹泻率和死亡率，提高小鼠绒毛的完整度和增加黏液蛋白的分泌（P＜0.05）,减少结肠细胞的凋亡（P＜0.05）,抑制鼠伤寒沙门菌对小鼠的危害。冠突散囊菌Ec-12菌株上清作用于鼠胃肠道内的鼠伤寒沙门菌，破坏了鼠伤寒沙门菌结构完整性，同时又作用于鼠的肠道，提高肠绒毛完整性，促进结肠黏液蛋白的分泌，减少结肠细胞的凋亡，进而降低鼠伤寒沙门菌引起的腹泻及死亡，它具备一定益生的潜力。
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铜在狐尾藻中的积累及亚细胞分布和化学形态
《农业环境科学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探索狐尾藻对重金属铜的积累和耐性机制,本研究通过水培试验,研究不同浓度铜处理(0、20、50 mg·L-1)对狐尾藻(Myriophyllum spicatum L.)生长生理特性以及叶片表皮细胞形态的影响,分析各器官中铜吸收转运及铜在各组织器官亚细胞中的分布和化学形态.结果表明:各浓度铜处理下狐尾藻均能存活,但铜浓度高于50 mg·L-1时,狐尾藻根、茎、叶生物量相比对照(铜0 mg·L-1)处理降低53.48%、36.99%和32.22%.铜处理后,狐尾藻根、茎和叶铜含量分别为11.81~186.34、1.32~7.89、2.11~11.99 mg·kg-1,根系中铜含量均高于叶片和茎部.铜在狐尾藻中的亚细胞分布主要位于根、茎、叶的细胞壁部分(36.49%~49.61%、45.44%~49.92%、41.45%~55.92%),其次是可溶性组分(21.65%~25.99%、23.03%~27.65%、18.01%~34.63%).狐尾藻中铜的赋存化学形态以盐酸提取态、醋酸提取态和乙醇提取态为主,所占比例为76.34%~86.67%,均是活性较低的形态.因此,狐尾藻是铜富集较好的植物,其根部的耐性大于茎、叶.铜以吸附态或蛋白质、果胶酸盐等低活性形态赋存于细胞壁或可溶性组分(液泡)中是狐尾藻积累和耐受铜的重要机制.
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武夷肉桂加工中挥发性成分糖苷结合物和香气品质形成研究
《茶叶科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：肉桂是武夷岩茶主栽品种,具有馥郁的花果香和辛锐的桂皮味特征.为明确武夷肉桂关键呈香物质和挥发性成分糖苷结合物(GBVs)对香气的贡献,采用超高效液相色谱四极杆/静电场轨道阱质谱仪系统(UHPLC-Q-Exactive/MS)和顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用(HS-SPME-GC-MS)技术对武夷肉桂加工过程 GBVs和香气物质动态变化进行研究.结果表明,共检测到武夷肉桂 11 个不同加工阶段的 276 种香气物质,这些香气物质包括酯类、醇类、杂环化合物类、酮类、醛类、萜类等多种组分,其中杂环化合物类、酯类、萜类和醇类香气组分含量较高.正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)发现,武夷肉桂中 30 种特征香气物质变量重投影要性值和香气活度值均大于 1,其中具有青味的(Z)-3-己烯醇和(E)-2-己烯醛含量在加工过程中下降,呈花香或果香的芳樟醇、苯甲醇、苯乙醛、香叶醇和 β-罗勒烯含量在加工过程中上升,脱氢芳樟醇和 α-石竹烯具有辛香的特征,可能是肉桂品种特征香气桂皮辛香的主要贡献物.在武夷肉桂毛茶中芳樟醇、苯乙醛、苯甲醇、2-乙氧基-3-甲基吡嗪和(E,E)-3,5-辛二烯-2-酮等物质香气特征影响值大于 1,说明这些物质是武夷肉桂加工过程中关键呈香物质.在武夷肉桂中鉴定到 10 种GBVs,在加工过程中,葡萄糖苷的含量呈上升趋势,而樱草糖苷的含量呈下降趋势,GBVs总含量上保持相对稳定.在做青后期,葡萄糖苷和樱草糖苷的含量都呈现下降趋势,特别是苯甲基樱草糖苷、2-苯乙基樱草糖苷、香叶基樱草糖苷、芳樟基樱草糖苷和香叶基葡萄糖苷显著下降,结果表明GBVs参与了武夷肉桂花果香和甜香的形成.研究结果阐明武夷肉桂特征香气成分以及GBVs在武夷肉桂香气形成中的作用,有利于更好地提升武夷肉桂香气品质,提质增效.
关键词： 武夷肉桂 代谢组学 加工过程 香气 挥发性成分糖苷结合物
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异烟酸甲酯/α-环糊精微胶囊制备及其对蓟马的引诱效果分析
《植物保护学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为研制环境友好型和可控释放的蓟马信息化合物新剂型，通过饱和溶液搅拌法制备异烟酸甲酯/α-环糊精微胶囊，采用L9（34）正交试验确定最佳包埋条件，通过红外光谱、X-衍射和扫描电镜对微胶囊结构进行分析，探讨微胶囊的释放动力学，并应用于田间大棚诱集蓟马明确其引诱效果。结果显示，微胶囊最佳包埋条件是温度为40℃、搅拌速率为800 r/min、芯壁质量比为0.3∶1.0、反应时间为3 h，该条件下的包埋率为53.16%；制备的微胶囊呈球状结构，分散均匀；微胶囊释放动力学符合Korsmeyer-Peppas模型，其释放机制由Fickian扩散控制。微胶囊诱集瓜蓟马Thrips palmi的平均数量达到475.5只/板，分别是对照和异烟酸甲酯原药诱集数量的2.58倍和1.96倍，，说明微胶囊具有良好的缓释性能、持效期和引诱效果。表明蓟马引诱剂微胶囊化可提高其稳定性和持久性，可用于昆虫信息素缓释载体产品研发。
关键词： α-环糊精 异烟酸甲酯 微胶囊 释放动力学 蓟马 引诱效果
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变形假单胞菌免疫刺激复合物对大黄鱼口服免疫效果的评价
《农业生物技术学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是大黄鱼(Larimichthys crocea)内脏白点病的主要病原，可导致巨大经济损失。前期研究表明免疫刺激复合物(immune stimulating complexes, ISCOMs)具有较好的口服免疫效果。为了评价口服变形假单胞菌ISCOMs免疫大黄鱼的效果，本研究制备具有笼格状纳米颗粒结构的变形假单胞菌ISCOMs疫苗(Pp-ISCOMs)，检测口服免疫后21 d大黄鱼头肾的各免疫因子的基因表达水平，通过菌体血清凝集方法测定免疫后大黄鱼血清效价，并测定其免疫保护力。结果显示，与灭活变形假单胞菌(Pp)和空白对照(CK)相比，口服免疫Pp-ISCOMs的大黄鱼头肾的髓样分化因子88 (myeloid differentiation factor 88, MyD88)(P<0.05)和白介素2 (interleukin 2, IL-2)(P<0.001)等免疫相关因子表达显著提高；受免21 d的大黄鱼血清凝集效价为2～2；用5.0×10～2 CFU/g剂量的变形假单胞菌腹腔注射攻毒后，Pp-ISCOMs和Pp受免鱼的相对免疫保护率分别为73.3%和40%。研究表明变形假单胞菌ISCOMs口服免疫可提高大黄鱼抗变形假单胞菌感染能力，具有良好的应用前景。本研究为大黄鱼内脏白点病的免疫防控提供了技术支撑。
关键词： 变形假单胞菌 免疫刺激复合物(ISCOMs) 口服 大黄鱼 免疫效果
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摩氏假单胞菌环脂肽合成基因簇xtlABC的功能研究
《中国生物防治学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：摩氏假单胞菌Pseudomonas mosselii Pt A1是对多株青枯菌均有良好抑制作用的生防菌，基因组中含有完整的环脂肽合成基因簇xtlABC。为了探明摩氏假单胞菌PtA1中xtl ABC基因簇的功能，本研究利用同源重组技术获得缺失突变体ΔxtlA、ΔxtlBC和Δxtl ABC，通过Southern blot验证突变体正确后，分析其对菌株生长速率、游动性、生物膜及生防相关性状等表型的影响。研究结果显示，与野生型菌株Pt A1相比，突变体ΔxtlA、ΔxtlBC和ΔxtlABC在LB培养基中的生长速度变慢，在游动培养基上的迁移直径分别减少了12.6、12.5和13.5mm，生物膜形成量分别降低了30.41%、29.16%和30.70%，对4种青枯菌的抑菌圈直径显著减小。盆栽试验表明，接种青枯菌GMI1000后4d，处理组PtA1+GMI1000、ΔxtlA+GMI1000、ΔxtlBC+GMI1000和ΔxtlABC+GMI1000对番茄青枯病的防效分别为44.93%、9.49%、10.46%和7.66%，第10 d的防效分别为42.43%、19.56%、31.40%和24.79%，处理组PtA1+GMI1000防治效果最好，与xtlABC突变体处理组差异显著。综合分析表明xtlABC基因簇影响菌株自身的生长及生防相关性状，该基因及其合成的次生代谢产物在抑制青枯菌中起重要作用。
关键词： 摩氏假单胞菌 环脂肽 基因簇xtlABC 青枯菌 抑菌作用
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