科研产出
瓠瓜CAT家族成员鉴定及响应白粉病菌的表达分析
《上海农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探究瓠瓜(Lagenaria siceraria) CAT基因家族的特性及在白粉病菌侵染后的作用,基于瓠瓜基因组数据和转录组数据,对LsCATs家族成员进行了鉴定与分析,研究其表达模式。结果表明:在瓠瓜基因组中共鉴定到2个CAT家族同源基因,其编码蛋白氨基酸数分别为489、1 019个,且均为亲水性蛋白;进化分析表明,瓠瓜CAT基因家族被分成2个亚组,推测在相同亚组的瓠瓜与黄瓜CAT转录因子可能具有相似的功能;利用MEME软件预测得到15个motif元件,不同CAT基因家族的motif数量及分布存在一定差异;顺式作用元件分析表明,LsCATs的启动子包含ABA、乙烯、MeJA、干旱、低温等多种与逆境胁迫有关的响应元件;瓠瓜接种白粉病菌后,LsCAT1表达量呈现出先升高后降低的趋势,LsCAT2则表现为先下降后升高的趋势,表明LsCAT1、LsCAT2可能与瓠瓜的白粉病抗性相关。本研究可为CAT基因在瓠瓜抗病机制的研究提供理论依据。
关键词： 瓠瓜 CAT 基因家族 白粉病菌 系统发育 表达模式
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松花菜种子贮藏过程中生理生化变化研究
《上海农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：以松花菜‘沪松85’种子为供试材料,研究了松花菜种子贮藏1—8年过程中种子活力、种子中抗氧化酶活性、丙二醛(MDA)、维生素E(VE)和不饱和脂肪酸含量的变化。结果表明:随着松花菜种子贮藏时间增加,种子浸出液电导率升高,种子活力和幼苗素质下降,种子中SOD、APX活性降低,VE、不饱和脂肪酸芥酸和油酸含量降低,MDA含量增加。在常温干燥石灰桶中,贮藏3年的松花菜种子活力显著下降,贮藏8年的松花菜种子活力最低。建议松花菜种子在常温干燥石灰桶中贮藏时间不宜超过2年。
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梯棱羊肚菌菌丝体和子实体多糖提取工艺优化及抗氧化和免疫活性
《食用菌学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：采用单因素实验研究提取时间、温度和液料比对梯棱羊肚菌（Morchella importuna）菌丝体多糖（MIMP）和子实体多糖（MIFP）中多糖含量的影响，通过响应面法确定MIMP、MIFP最佳提取工艺参数，对其结构进行初步分析，并比较其抗氧化和免疫活性。结果表明：MIMP的最佳提取条件为166 min、86℃、液料比31∶1（mL∶g），提取物中多糖含量为（54.25±1.30）%；其主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖组成，摩尔比为0.71∶0.11∶0.07；重均分子量Mw和数均分子量Mn分别为5.082×10～4、3.160×10～4 g·mol-1。MIFP的最佳提取条件为161min、86℃、液料比31∶1（mL∶g），提取物中多糖含量为（39.85±1.55）%；其主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖组成，摩尔比为0.42∶0.31∶0.22；重均分子量Mw和数均分子量Mn分别为1.263×10～4、8.345×10～3 g·mol-1。当质量浓度为1.0 mg·mL-1时，MIMP、MIFP对ABTS自由基的清除率分别为74%、53%，对DPPH自由基的清除率分别为61%、46%，对羟自由基的清除率分别为78%、51%；在0.1～1.0mg·mL-1范围内，对自由基清除率逐渐提高，且MIMP高于MIFP。25～100μg·mL-1的MIMP和MIFP均能刺激巨噬细胞释放NO，两者活性无差异。研究结果可为梯棱羊肚菌菌丝体和子实体多糖的开发提供参考。
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禾谷镰刀菌异质核糖核蛋白FGSG_07478功能研究
《南京农业大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]异质核糖核蛋白（heterogeneous nuclear ribonucleoproteins, hnRNP）是一类RNA结合蛋白，在RNA代谢的各个方面发挥着重要作用。将目前已注释的镰刀菌hnRNP G在禾谷镰刀菌基因组中进行比对，得到其同源蛋白FGSG＿07478。本研究旨在考察该蛋白在禾谷镰刀菌生长发育、抵抗逆境、产毒和致病等方面的作用。[方法]基于同源重组原理和聚乙二醇（PEG）介导的原生质体转化方法，获得FGSG＿07478基因敲除突变体ΔFGSG＿07478,观察测定其在营养生长、无性繁殖、有性生殖、抵抗逆境中的变化，同时进行小麦胚芽鞘接种试验验证其致病力。通过超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）检测ΔFGSG＿07478产生脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的能力，并利用RT-qPCR检测野生型菌株PH-1和突变菌株ΔFGSG＿07478中参与DON生物合成的7个TRI基因的相对表达量。[结果]突变菌株ΔFGSG＿07478的生长速率较野生型菌株PH-1慢16.2%,产孢量降低43.4%;有性生殖诱导结果显示ΔFGSG＿07478的有性生殖能力减弱，较野生型产生更少的子囊壳。胁迫因子敏感性测定结果显示，ΔFGSG＿07478对H2O2和十二烷基硫酸钠（SDS）等胁迫因子的敏感性显著增加，对刚果红的抗性显著增加。此外，与野生型相比，虽然致病力无明显差异，ΔFGSG＿07478的DON生物合成量显著减少，TRI4、TRI5、TRI6、TRI8、TRI10、TRI12和TRI101等基因表达水平显著降低。[结论]FGSG＿07478在禾谷镰刀菌的生长发育、有性生殖、逆境胁迫以及产毒过程中发挥着重要作用。
关键词： 禾谷镰刀菌 异质核糖核蛋白(hnRNP) 基因敲除 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)
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油菜作绿肥还田利于水稻生长和产量提高
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为明确油菜作绿肥还田对后茬稻田土壤理化性质、后茬水稻生长和产量的影响，本研究采用田间试验，以水稻品种‘青香软粳’为试验材料，探索油菜品种‘沪油21’作绿肥还田的土壤培肥效应以及对供试水稻生长和产量的影响。结果表明：油菜‘沪油21’作绿肥还田后，土壤碱解氮、有效磷和速效钾的含量均高于无绿肥还田（CK），水稻株高和叶绿素含量增加，且20%化肥减量对供试水稻株高和叶绿素含量影响较小。供试水稻的产量及其产量构成因子穗粒数、有效穗数随油菜还田量的增加均呈增加趋势，而千粒重呈递减趋势，但差异均未达显著性水平。此外，当油菜还田量达22 500 kg/hm2时，供试水稻增产效果明显，且在该还田量下减施20%的化肥仍可有效增加水稻产量。
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超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水中两类含氟新污染物
《分析试验室 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：建立了一种同时测定水中17种全氟化合物（PFCs）和13种氟喹诺酮类抗生素（FQs）的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）分析方法。17种PFCs和13种FQs在0.1～100μg/L范围内线性良好，相关系数（R）均大于0.996，方法检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.01～0.30 ng/L和0.04～1.00 ng/L。在不同加标水平下，目标化合物的回收率在64.1%～111%之间，相对标准偏差（RSD）为0.9%～13%。将该方法用于检测工业废水中的2类含氟化合物，共检出9种化合物，其中全氟辛酸（PFOA）检出量最大，为118 ng/L。该方法可用于水样中2类含氟污染物的分析检测。
关键词： 固相萃取 超高效液相色谱-串联质谱 水 全氟化合物 氟喹诺酮类抗生素
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对神经元氧化应激损伤具有保护活性的灵芝化合物体外筛选及作用机理
《南方农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]筛选灵芝中具有保护神经元活性的化合物,并探究其相应的作用机理,为研发具有预防和治疗阿尔茨海默病(AD)功效的灵芝功能性食品、保健品和药品提供科学依据.[方法]基于β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的氧化损伤建立细胞模型,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法、铁离子还原/抗氧化能力检测法和2,2-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除法初步评估得到的抗氧化活性较强的灵芝醇提物进行筛选,并对其神经元保护活性进行评价.进一步利用灵芝醇提物中与抗氧化有关的4种三萜类化合物,验证其活性并通过表面等离子共振技术探究其相关作用机理.[结果]DPPH、ABTS自由基清除及铁离子还原/抗氧化能力等体外理化初筛与细胞水平筛选试验结果表明,6种灵芝醇提物(108、161、106-2、171、173和109)抗氧化保护神经元活性较强,其中108、109和106-2样品对大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化应激损伤的保护效果最好;灵芝醇提物可通过缓解细胞周期紊乱、抑制细胞早期凋亡、提高超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽(GSH)含量,抑制丙二醛(MDA)含量上升来发挥神经元保护作用.灵芝醇提物108、106-2和109中4种三萜类化合物(灵芝醛A、灵芝酸B、灵芝酸C2和灵芝酸LM2)的平均含量占比相对较高.活性验证表明4种化合物对细胞氧化应激损伤均有明显修复效果,其中灵芝醛A与Aβ1~42具有较强的亲和力,其KD值为15.62 μmol/L,可通过与Aβ1~42竞争性结合来抑制Aβ1~42与RAGE结合.[结论]灵芝醇提物的抗氧化神经元活性通过灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸LM2和灵芝醛A 4种化合物的协同效应来实现.灵芝醛A能通过与RAGE竞争性结合来减轻或抑制Aβ1~42细胞毒性作用.灵芝具有开发防治AD功能性产品的潜力.
关键词： 灵芝醇提物 淀粉样β蛋白肽 灵芝三萜 自由基 阿尔茨海默病
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菌丝培养期温度和时间对金针菇产量的影响
《食用菌学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：研究金针菇（Flammulina filiformis）发菌室内菌丝培养期温度（15、16、17℃，分别记为低温LT、中温MT、高温HT）和时间（20～27 d）对产量的影响，结果表明：在菌丝培养过程中，随着培养时间延长，栽培瓶内培养料温度逐渐升高，栽培瓶内外温差最高可达4℃，HT的瓶内平均料温高于LT 3.16℃。菌丝培养22～27d后出菇，MT菌丝培养22d的产量最高(每瓶472.13g)。以MT每天培养温度总和为基准，分别通过延长和缩短LT和HT的培养时间，使三者温度总和相同，比较出菇产量，发现LT(23 d，每瓶465.69 g)和HT(20 d，每瓶393.94 g)平均产量均低于MT(22 d，每瓶472.13 g)。发菌室1～6 d为16℃、7～22 d为14℃的条件可以提高产量。
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采用超高效液相色谱-串联质谱技术研究桔霉素在SD大鼠血浆中的动力学规律
《工业微生物 》 2024 CSCD
摘要：文章旨在建立一种超高效液相色谱串联质谱（UHPLC-MS/MS）法用于检测SD大鼠血浆中的桔霉素（CIT），并计算其毒代动力学参数。经验证，该方法的CIT在0.2～200μg/L质量浓度范围内，具有良好的线性关系（R2=0.999 6），灵敏度高（检出限为0.1μg/L，定量限为0.2μg/L）；在4个不同添加水平下，回收率为88.93%～107.38%，日内精密度和日间精密度分别为1.77%～3.62%和3.14%～6.95%，稳定性为2.12%～7.91%。研究将CIT以1.125 mg/（kg·bw）的剂量灌胃大鼠（n=5），并运用建立的UHPLC-MS/MS法检测不同时间点上大鼠血浆中的CIT质量浓度，以揭示其在大鼠体内的动力学规律。研究结果表明，给药后，在0～2 h内，CIT的质量浓度逐渐上升，并在2 h达到最大值，最大质量浓度为4 078.37μg/L，随后质量浓度逐渐下降，并在72 h后血浆中的CIT质量浓度低于方法定量限。动力学参数计算结果显示，SD大鼠血浆中CIT的半衰期为45.59 h；消除速率为0.053 L/（kg·h）；药时曲线下面积为21 289.96μg·h/L；表观分布容积为0.194 L/kg。研究结果为阐明CIT的毒代动力学特征提供了重要依据，有助于完善CIT的风险评估数据。
关键词： 桔霉素 动力学 超高效液相色谱-串联质谱技术 大鼠
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铁改性生物炭-凹凸棒石载体固定化菌剂制备及其对氯苯污染土壤修复作用
《生态环境学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：氯苯是有机化工行业重要的中间体和有机溶剂,经生产、运输过程泄漏以及末端违规排放而迁移至土壤,严重威胁生态环境和人体健康.氯苯对土壤的污染状况及绿色高效修复一直是环境领域的热点问题.微生物修复技术具有能耗低、绿色无二次污染等优点,但其在污染土壤中的实践往往面临菌株存活能力差、降解效率低等关键技术难题.生物炭可作为载体固定化高效降解微生物,但其性能常受到比表面积、官能团等因素制约.将硫酸铁、凹凸棒石和芦苇秸秆以 1?2?10 的比例均匀混合后在 500℃条件下无氧热解 2 h,对芦苇生物炭进行改性以提高其对降解微生物的固定能力.进一步优化了载体固定化铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa W3的条件,制备铁改性生物炭-凹凸棒石载体固定化菌剂(BFAT@W3),并将其应用于污染土壤修复.结果表明,经硫酸铁和凹凸棒石改性后的生物炭比表面积(210.7 m2·g-1)和孔体积(0.13 cm3·g-1)较高,官能团种类丰富.固定化降解微生物的最佳条件为吸附温度 37℃、吸附时间 16 h、载体投加量 15 mg·mL-1,此条件下固定的有效活细胞浓度为 2.10×109 cell·g-1.在实际氯苯污染土壤中,投加比例为 3?100 的BFAT@W3 材料对氯苯去除率较高(83.4%),较相同比例的W3 提高了 18.6%.16S rRNA高通量测序结果显示,3?100 的BFAT@W3 能有效增加土壤中变形菌门(Proteobacteria)和假单胞菌属(Pseudomonas)的相对丰度,相较于同比例的W3 处理组分别提高了 41.3%和 36.7%,增强了降解微生物在土壤群落中的竞争优势.该研究通过制备性能良好的铁改性生物炭-凹凸棒石载体固定化高效降解菌剂,可为氯苯污染土壤的生物修复提供技术支撑.
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