科研产出
大白菜WRKY转录因子的全基因组鉴定与分析
《浙江农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：WRKY转录因子是一类重要的调控分子,在高等植物中以基因家族的形式存在。试验以大白菜基因组数据为材料,利用生物信息学手段对WRKY转录因子进行了全基因组鉴定与分析。结果表明,大白菜至少有134个WRKY转录因子,蛋白序列长度为143~1 082;基因组DNA全长880~9 099 bp,具1~15个内含子。染色体定位结果表明,10条染色体上均有WRKY转录因子基因的分布,A3染色体上最多(26),A10染色体分布最少(4)。大白菜WRKY转录因子可分为3大类,Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类的数量分别为27,83和24,它们处于进化树的不同分支。除保守的WRKYGQK和常见变异序列WRKYGKK外,新发现WRKDGQK,WRKNGQK和WMKYGQK等3种WRKY结构域类型。
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基于Gateway技术的低成本植物双分子荧光互补分析系统
《浙江农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：创制基于Gateway重组技术的双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)载体,同时创制低成本低克隆背景的Gateway入门载体。利用入门载体,采用Gateway技术快速将目标基因重组到BiFC目标载体,并采用农杆菌注射侵染烟草的方法观察荧光互作结果。构建的Gateway入门载体,由于带有ccdB基因,非线性化的载体无法在ccdB敏感菌株中生长,因此消除了载体本身的背景。同时由XcmⅠ酶切后产生的T突出,可以很好地与PCR产物结合,连接效率和普通商业化T载体一致。此外,由于载体可由实验室自行制备且采用了TA克隆,创制入门克隆的成本大大降低。借助该研究改造的BiFC目标载体,目的基因能快速地重组到目的载体用于基因互作鉴定。利用本研究构建的Gateway系统,能够以较低成本快速的进行基因克隆和互作研究。
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聚乙二醇(PEG)介导的甜瓜蔓枯病菌的转化(英文)
《农业生物技术学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：蔓枯病是当前危害瓜类的主要病害,但是蔓枯病菌(Didymella bryoniae)病原学研究还非常落后,关于该菌功能基因的研究报道还较少。为了建立聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)介导的甜瓜蔓枯病菌原生质体遗传转化体系,本研究利用带有潮霉素B磷酸转移酶(hph)基因的质粒pSGate1为载体,通过PEG(分子量3350)介导的融合法转化蔓枯病菌株ZJDB32。将病菌分生孢子于PDB培养液(200g/L马铃薯煎汁,20g/L葡萄糖)内震荡培养20h,然后收集产生的幼嫩菌丝,在10mg/mL lysing enzyme+5mg/mL driselase酶液内28℃酶解3h,每克湿菌丝能产生3.8×107个原生质体。PEG介导融合转化pSGate1至D.bryoniae原生质体,每毫克ZJDB32的DNA转化效率最高能得到1230个转化子。结果表明,20个代表性的ZJDB32的转化子继代4次后其潮霉素抗性、生长速率、产孢量和致病性与野生型都没有明显变异,这些转化子可以进一步用于相关功能研究。因此,该转化体系的建立为甜瓜蔓枯病菌功能基因的深入研究提供了基础资料。
关键词： 甜瓜蔓枯病菌 原生质体转化 聚乙二醇 转化效率 稳定性
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枇杷籽提取物抗氧化及环氧合酶抑制活性研究
《中国食品学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为研究枇杷籽中的抗氧化与抗炎活性成分,将枇杷籽用70%乙醇提取获得粗提物,再依次用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、蒸馏水提取得到不同极性的溶剂组分。采用福林酚法测定粗提物及各溶剂组分的总酚含量;通过DPPH和O2-自由基清除试验及β-胡罗卜素-亚油酸体系褪色抑制试验,评估粗提物及各组分的抗氧化活性;通过环氧合酶(COX)体外抑制试验,评价粗提物及各组分对COX-1和COX-2的抑制活性。结果表明:枇杷籽粗提物以水溶性组分为主(78.58%),水溶性组分的总酚含量和抗氧化活性高于粗提物,并显著高于其它溶剂组分(P<0.05)。枇杷籽粗提物、水溶性组分和甲醇组分具有COX-1和COX-2抑制活性,其活性排序为水溶组分>粗提物>甲醇组分,三者对COX-1和COX-2的抑制无明显的选择性。
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水稻不同品种组培再生和转基因频率研究
《核农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：本研究选取21个(包括16个籼稻品种和5个粳稻品种)在农业生产上具有重要应用价值的水稻品种,对它们进行成熟胚的组培再生能力以及转基因效率的考察。结果表明:以NBm诱导培养基进行愈伤诱导时,各水稻品种的愈伤诱导率介于30.37%和72.46%之间;以NBm和DL3分化培养基对各水稻品种不同日龄愈伤分别进行植株再生培养,并以植株再生率(plant regeneration rate,RR)和每粒愈伤平均出苗数(the mean number of regenerated shoots,NRS)对再生能力进行考察时,不同水稻品种的组培再生能力表现较为复杂,同时受到基因型、愈伤日龄和培养基成分的重大影响。在NBm分化培养基上,以日龄15d的To974愈伤RR(84.00%)和NRS(2.96)最高,在DL3分化培养基上,以日龄15d的To974愈伤RR(73.33%)和粤泰B愈伤NRS(3.55)分别为最高。此后,利用根癌农杆菌介导的转基因方法对其中12个水稻品种进行Bt基因转化实验,经PCR验证后发现,共成功实现7个品种的Bt基因转化,各水稻品种的转化效率介于0~25%之间,且与其再生能力相关。
紫云英的农艺性状变异
《草业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以广泛应用的9个紫云英(Astragalus sinicus)品种为试验材料,测量其株高、干质量、粗蛋白含量等12个农艺性状,研究其农艺性状变异。结果表明,紫云英农艺性状存在较大变异,其中变异幅度最大的是分枝数,其品种内个体间差异最大,变异系数达0.310。聚类分析结果基本反映了紫云英品种的熟期,熟期相同的品种之间遗传距离较近。熟期相同的品种农艺性状相似,早熟种粤肥2号和信阳种营养生长较弱,营养成分含量亦较低,中熟种闽紫6号和闽紫7号叶长、叶宽、株高、茎粗及单株干质量等性状都明显优于其余品种。
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山核桃中类脂褐素提取方法的研究
《中国粮油学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：对山核桃中类脂褐素的提取方法进行了研究,摸索了山核桃中类脂褐素的特征荧光光谱,找到了山核桃中类脂褐素测定的最佳前处理方法,并以此为基础通过单因素试验和L9(34)正交试验,研究了提取方式、提取温度、提取时间以及提取溶剂pH对类脂褐素提取率的影响。结果表明采取乙醚进行除油前处理和氯仿∶甲醇∶磷酸缓冲溶液(2∶1∶1)的提取溶剂,提取时间为2.0 h,提取温度50℃,提取液pH 6.0时山核桃类脂褐素的提取率最高。
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野生长果桑种质资源考察及繁育技术研究
《西南农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：考察了滇南地区113份长果桑资源材料,其中66份开雌花并结果,47份开雄花,果长最长达18 cm。66份开雌花结果的桑椹中有44份结实,27份发芽,通过嫁接和扦插,育苗成功率分别达到92.42%和87.9%。对27份具有代表性材料经嫁接后与野生株进行比较,嫁接株大都表现出米条长产果量减少、果形和叶幅略变大、1年生枝条节距变短等幼龄化现象,充分利用长果桑种的特殊经济价值,对促进蚕桑产业的多元化发展具有积极重要意义。
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褐飞虱对同类昆虫遇险释放挥发物的行为反应
《浙江农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：利用"Y"型嗅觉仪测定了褐飞虱对同类昆虫遭遇草间小黑蛛捕食时产生的挥发性物质的行为反应,目的验证褐飞虱在遭遇危险时是否产生向同类报警的化学信号。结果表明,褐飞虱若虫对草间小黑蛛释放的挥发性物质无逃避反应,对同类昆虫遭遇草间小黑蛛捕食时释放的挥发性物质的反应因虫龄而异,其中2～3龄若虫有极显著的逃避反应,1龄和4～5龄若虫无明显反应。该结果说明褐飞虱2～3龄若虫在遭遇天敌捕食时会释放挥发性化学物质,产生报警行为,向同类昆虫发出危险警示信号,但褐飞虱1龄或4～5龄若虫的报警行为不明显,其原因可能是褐飞虱4～5龄若虫不易被草间小黑蛛捕食或者褐飞虱1龄若虫虽易被捕食,但其产生的报警信号不明显。
关键词： 褐飞虱 草间小黑蛛 “Y”型嗅觉仪 挥发性物质 行为反应
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